PCR實驗室設計及建設要求
概述:
PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。是一種分子生物學技術。PCR實驗室可分為四個單獨區域:試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要
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PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。是一種分子生物學技術。PCR實驗室可分為四個單獨區域:試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,為避免各實驗區域間交叉污染,進入各個工作區域須遵循單方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。
PCR試劑貯存和準備區
試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區,不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。
PCR標本制備區
該區域主要進行樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。
本區的壓力梯度要求為:鄰近區域為正壓,避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動。
擴增反應混合物配制和擴增區
已制備的DNA模板 (來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。
本區的壓力梯度要求為:鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。
擴增產物分析區
本區是最主要的擴增產物污染來源,因此對本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。
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